Иммобилизационный стресс что это такое

Содержание

Иммобилизационный стресс что это такое
Иммобилизационный стресс что это такое
Иммобилизационный стресс что это такое

Иммобилизационный стресс что это такое

Иммобилизационный стресс вызывали у обезьян, содержавшихся в нормальных клетках стабилизированными группами. Рассмотрим действие стресса этого типа на поведение обезьян в разные периоды эксперимента.

До эксперимента поведенческие показатели и состав сфер активности у исследуемых животных были такими же, как у группы самцов, содержащихся в клетке, в норме.
В группе самцов павианов-гамадрилов, содержащихся вместе в одной клетке, была отмечена четко выраженная линейная иерархия, проявляющаяся в целом ряде показателей — направленности и частоте подставлений, подходов-уходов, грумингов, агрессивных действий. Агрессивное поведение проявлялось редко, так как группа была стабильной, в основном наблюдались агрессивные предупредительные и конфликтные элементы. Показатели манипуляционнои активности были несколько ниже средних видовых, что, возможно, связано с неестественным составом группы.

Но в целом показатели манипуляционнои активности находились в пределах нормы. Распределение форм активности особей также почти не отличалось от нормы, за исключением сферы репродуктивного поведения. На первом этапе эксперимента (во время иммобилизации) отмечались подергивания телом и головой, сопровождающиеся вокализацией. Интенсивность проявления этих элементов была прямо пропорциональна рангу животного.

Частота различных патологических элементов поведения (например, судорожные подергивания) была наименьшей у наиболее подчиненной особи z и низкой у самца а. Максимальные частоты проявления патологии поведения отмечали у промежуточных по рангу особей р и у.

На втором этапе (в течение первых 2 ч после иммобилизации) выявлены резкие нарушения индивидуального и группового поведения. Особенно сильно они проявлялись в 1-й час после стресса. Животные в основном сидели, опираясь на окружающие предметы, или лежали в неестественных аморфных позах. Отмечали подергивания, дрожание конечностей, замедленность движений, вялость, нарушения координации. У самцов павианов-гамадрилов на этом этапе эксперимента выявлены элементы, сходные с таковыми у особей, содержащихся в индивидуальных метаболических клетках: полуоскал со смещением челюсти, оскал с трясением челюсти, некоординированные движения передних конечностей, движения нижней челюстью вверх-вниз.

Элементы агрессивного поведения были направлены и представлены набором замещающих элементов. Смешанная активность проявлялась частым облизыванием, сменой поз, раскачиванием туловища. По отношению к пищевым объектам отмечалось затрудненное поднимание пищи: вначале объект животные поднимали ртом, не могли удержать его на весу у рта, часто роняли, отсутствовали движения отдельных пальцев, объект захватывался всей кистью.

В сфере комфортного поведения отмечали попытки совершить отдельные элементы, например, пытались почесать шею, но проводили рукой по воздуху. Отсутствовал интерес к непищевым объектам. Частота проявления агрессии была понижена. Отмечались скорее попытки оскала, полуоскала и других элементов.

В сфере дружелюбного поведения отсутствовал груминг, были редкие подставления. Не были выделены подходы-уходы. Мы отмечали смещенную активность, например, раскачивание, беспорядочные нашаривающие движения передних конечностей, захватывание частей собственного тела (например, захватывает рукой нос и держит его),

К концу 2-го часа появились элементы агрессивного и дружелюбного поведения, связанные с восстановлением ранговой системы, подставления, подходы-уходы, груминг. По-видимому, в это время имеется тенденция к тесному контакту между особями. Животные, например самцы Р и у, часто сидели, прижавшись друг к другу. Появились первые агрессивные реакции на людей. Появляется интерес к пище у всех особей группы, хотя движения остаются некоординированными, нечетко выраженными.
Через 2 ч появляются дифференцированные движения пальцев. Интерес к непищевым объектам в манипулятивных тестах отсутствовал.

Таким образом, через 2 ч после иммобилизационного стресса началось восстановление важных поведенческих систем. Вначале восстанавливалась сфера индивидуального поведения — пищевого, комфортного, локомоторного; затем, на исходе 2-го часа, начала восстанавливаться иерархическая система доминирования (подчинения). В групповом поведении дружелюбные элементы восстанавливались раньше, чем агрессивные. Вероятно, агрессивное поведение требовало больше энергетических затрат и поэтому после стресса восстанавливалось позднее, чем дружелюбные и нейтральные взаимодействия особей.

Возможно, сходное направление изменений в соотношении агрессивных и дружелюбных действий в стрессовых ситуациях имело место и у протогоминид: снижалась внутригрупповая агрессия и преобладало дружелюбное поведение, тенденция к сближению особей. Таким образом, стресс мог оказывать положительное влияние как фактор, тормозящий агрессию (особенно ее контактные формы) и способствующий развитию дружелюбного поведения.

Источник

Иммобилизационный стресс что это такое

Ведущее место в реакции организма на действие стресс-агентов различной природы занимает нейроэндокринный статус. При оценке данного статуса в условиях стресса для эндокринологов, в первую очередь, важен вопрос о регуляции гормональной системы. Связь между гипофизом, который является основным продуцентом ТТГ, и гипоталамусом осуществляется через портальную систему сосудов, а также через гипоталамо-гипофизарный тракт – самый короткий, но хорошо очерченный пучок аксонов нейронов гипоталамуса [1, 4,3]. По мнению многих исследователей, уровень ТТГ находится в тесной обратной связи с периферической эндокринной железой по принципу «плюс-минус взаимодействие» и служит наиболее объективным показателем функциональной активности всей тиреоидной системы. Отклонение в выработке ТТГ является наиболее ранним и чувствительным индикатором дисфункции ЩЖ [5, 7,9].

Щитовидная железа является ключевым звеном, через которое опосредуются защитно-адаптационные реакции организма. В условиях экспериментального стресса щитовидная железа подвергается несомненной активации с перспективой истощения при длительном воздействии интенсивного стресс-агента [6]. Значительно возросшее за последние годы стрессогенное воздействие предъявляет повышенное требование к системам адаптации организма и поиску способов коррекции[8].

Вышеизложенное делает актуальнымизучение изменения со стороны нейроэндокринной системы в условиях экспериментальной гипокинезии и применения антиоксидантовна основании оценки уровня тиреотропного гормона гипофиза и тиреоидных гормонов (Т3, Т4), что и является целью нашего исследования.

Материалы и методы

Исследование проведено на белых беспородных крысах-самцах 6-8 мес. возраста (весом 210–280 г.). Животных содержали в стандартных условиях вивария при естественном освещении. Все крысы были синхронизированы по питанию при свободном доступе к воде. Эксперименты проводили в весенне-летний период.

Животные были разделены на группы по 10 особей в каждой:1-ю группу составляли контрольные крысы, получавшие эквиобъем дистиллированной воды; 2-ю группу – животные, получавшие α-токоферол ацетат (10% масляный раствор α – токоферол ацетата «Марбиофарм») peros в дозе 5мг/кг ежедневно в течение 14 дней;3-ю группу — животные, получавшие эмоксипин (1% раствор «Московский эндокринный завод») в дозе 5мг/кг внутримышечно в течение 14 дней; 4-ю группу – крысы, подвергнутые воздействию иммобилизационного стресса в течение 14 дней; 5-ю группу – особи, получавшие α-токоферол ацетат («Марбиофарм») peros в дозе 5мг/кг и подвергавшиеся воздействию иммобилизационного стресса в течение 14 дней;6-ю группу – крысы, получавшие эмоксипин («Московский эндокринный завод») в дозе 5 мг/кг внутримышечно и подвергавшиеся воздействию иммобилизационного стресса в течение 14 дней.

Концентрацию гормоновтрийодтиронина, тироксина и ТТГ в плазме крови (предварительно хранившейся при -20ºС) определяли с использованием наборов фирмы «Accu-BindElisaMicrowells» (США) и фирмы «АлкорБио» (Россия). Концентрацию тироксина выражали в мкг/дл, трийодтиронина – в нг/мл, ТТГ – в мкМЕ/мл.

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с помощью пакетов программ: MicrosoftOfficeExcel 2007 (Microsoft, США), BIOSTAT 2008 Professional 5.1.3.1. с использованием t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони. Различия между параметрами считали достоверными при p 0,05). Применение эмоксипина у крыс данных групп не оказывало значимого влияния на секрецию тиреоидных гормонов: их показатели были сопоставимы с контрольными значениями (таблица 2).

Введение α-токоферола на фоне иммобилизационного стресса у крыс-самцов приводило к полной коррекции уровня Т3 и Т4: концентрация увеличилась на 40% (p

Источник

Иммобилизационный стресс что это такое

ФГБУ «Российский научный центр медицинской реабилитации и курортологии» Минздравсоцразвития России, Москва

ФГБУ «Российский научный центр медицинской реабилитации и курортологии» Минздрава РФ, Москва

НИИ нейрохирургии им. акад. Н.Н. Бурденко РАМН, Москва

Применение низкоинтенсивного электромагнитного излучения в условиях иммобилизационного стресса (экспериментальное исследование)

Журнал: Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2014;91(4): 47-52

Королев Ю. Н., Бобровницкий И. П., Никулина Л. А., Михайлик Л. В., Гениатулина М. С., Бобкова А. С. Применение низкоинтенсивного электромагнитного излучения в условиях иммобилизационного стресса (экспериментальное исследование). Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2014;91(4):47-52.

В экспериментах на нелинейных белых крысах самцах с помощью светооптических, электронно-микроскопических, биохимических и радиоиммунологических методов исследования было установлено, что применение низкоинтенсивного электромагнитного излучения (НИ ЭМИ; плотность потока мощности меньше 1 мкВт/см2, частота около 1000 МГц) в режиме как первичной профилактики, так и лечебно-профилактического воздействия ограничивало развитие постстрессорных нарушений в семенниках, печени и тимусе и способствовало активации адаптационно-защитных и компенсаторных процессов. Полученные данные обосновывают возможность использовать НИ ЭМИ для защиты организма и его репродуктивной системы от негативного действия стрессогенных факторов.

ФГБУ «Российский научный центр медицинской реабилитации и курортологии» Минздрава РФ, Москва

НИИ нейрохирургии им. акад. Н.Н. Бурденко РАМН, Москва

Проблема защиты организма от действия стресса является одной из наиболее актуальных проблем современной медицины. В качестве средств, способных повысить адаптационные возможности и защитить организм от действия стресса, целесообразно использовать различные виды электромагнитных излучений (ЭМИ) как в виде монофактора, так и при сочетанных воздействиях [1, 2]. Особый интерес представляют низкоинтенсивные ЭМИ (НИ ЭМИ) сверхвысоких частот, эффекты которых еще мало изучены. Предполагается, что механизм биологического действия НИ ЭМИ, в отличие от микроволн высоких интенсивностей, связан с поглощением определенных (резонансных) частот водной средой организма, в том числе молекулами воды биомембран, с последующим модулирующим влиянием этого взаимодействия на развитие метаболических процессов, в том числе адаптационного характера [3, 4]. В частности, было показано, что НИ ЭМИ влияет на внутриклеточные механизмы регуляции гомеостаза и межклеточные контакты, активирует органы иммунной системы, повышает противоопухолевую резистентность организма, снижает уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) за счет конформационных изменений в структуре мембран 6. Поэтому при использовании НИ ЭМИ можно ожидать усиления процессов адаптации на клеточном и ультраструктурном уровнях и повышения общей резистентности организма к действию стресса.

Цель настоящей работы — определить влияние НИ ЭМИ на снижение уровня постстрессорных нарушений при остром иммобилизационном стрессе у крыс.

Исследования были проведены на 27 белых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г. Работу с животными проводили в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите животных, используемых для экспериментальных целей (Страсбург, 1986). Крысы были разделены на 5 групп: 1-я группа (опытная) — предварительное применение НИ ЭМИ (первичная профилактика) с последующим воздействием иммобилизационного стресса; 2-я группа (контроль к 1-й группе) — воздействие иммобилизационного стресса и ложных процедур НИ ЭМИ (без включения аппарата); 3-я группа (опытная) — воздействие иммобилизационного стресса с последующим применением НИ ЭМИ (лечебно-профилактическое применение); 4-я группа (контроль к 3-й группе) — воздействие иммобилизационного стресса и ложных процедур НИ ЭМИ (без включения аппарата); 5-я группа (интактная) — животные никаким воздействиям не подвергались.

Иммобилизационный стресс осуществляли по методике Г. Селье однократным привязыванием крыс в течение 6 ч в положении на спине. Процедуры НИ ЭМИ проводили от аппарата Акватон-2 (ООО «Телемак», Саратов), плотность потока мощности меньше 1 мкВт/см 2 , частота около 1000 МГц. Всего на курс 8 процедур, время воздействия 2 мин. Животные облучались с расстояния 2-3 см от поверхности кожи поясничной области. Забой животных проводили через 1 день после действия стресса при первичной профилактике и через 9 дней — при лечебно-профилактическом применении НИ ЭМИ. Объектом исследования являлись органы репродуктивной системы (семенники), а также печень, тимус, кровь.

Для светооптических исследований семенники фиксировали в жидкости Буэна, оценка состояния сперматогенеза проводилась по общепринятой методике [7]. Подсчитывали количество извитых семенных канальцев (ИСК) с различным числом генераций половых клеток (от 4 до 0), определяли индекс сперматогенеза. Для электронно-микроскопических исследований семенники фиксировали в 4% параформальдегиде, приготовленном на фосфатном буфере (рН 7,4), постфиксировали в 1% ОsО 4 . После обезвоживания образцы заключали в смесь эпон-аралдит. Исследование ультратонких срезов проводили на электронном микроскопе Libra 120 (Германия). Для исследования антиокислительной активности (АОА) в семенниках и печени использовали модельную систему в виде суспензии липопротеинов желтка куриного яйца [8]. Уровень ПОЛ определяли по конечному продукту перекисного окисления липидов — малоновому диальдегиду [9]. Содержание белка определяли биуретовым методом [10], содержание нуклеиновых кислот (РНК и ДНК) — двухволновым спектрофотометрическим методом в модификации [11]. В плазме крови радиоиммунологическим методом определяли кортизол и тестостерон (фирма «ИБОХ», Беларусь). Статистическую значимость различий оценивали с помощью парного критерия Стьюдента и непараметрического U-критерия Манна-Уитни. Различия считали достоверными при р≤0,05.

После действия иммобилизационного стресса у животных контрольной группы через 1 сут определялось отчетливое снижение АОА в семенниках и печени, наличие выраженных признаков дистрофии и дегенерации со стороны сперматогенных клеток, снижение индекса сперматогенеза, активация процессов ПОЛ и снижение АОА, нарушение белоксинтезирующих процессов, уменьшение массы тимуса. В дальнейшем, к 9-м суткам последействия стресса, отмечалось как усиление ряда негативных явлений, особенно в семенниках (развитие процессов деструкции в сперматогенном эпителии, повышение уровня ПОЛ, снижение содержания общего белка), так и тенденция к активации некоторых ответных адаптационных реакций (АОА в печени, функциональной активности тимоцитов). Электронно-микроскопически обнаруживались нарушения во всех слоях собственной оболочки ИСК, являющейся частью гематотестикулярного барьера. Это проявлялось, в частности, в неравномерном утолщении оболочки в 1,5-2 раза, разрыхлении и местами истончении базальной мембраны, набухании ее неклеточных слоев. Нарушения барьерных структур ИСК вызывали усиление процессов вакуолизации с образованием как мелких, так и крупных локальных отеков, которые нарушали контакты между собственной оболочкой и сперматогенными клетками. Все это свидетельствовало о существенных нарушениях процессов микроциркуляции, что приводило к расстройствам трофики и метаболизма в эпителии семенных канальцев.

Предварительное применение НИ ЭМИ повышало устойчивость организма крыс к последующему действию острого иммобилизационного стресса. При этом через сутки после стресса защитный эффект в семенниках проявлялся в лучшей сохранности клеток сперматогенного эпителия, что выражалось, в частности, в более сбалансированном количестве ИСК с 4 и 3 генерациями половых клеток по сравнению с контролем (см. таблицу). На ультраструктурном уровне явно слабее, чем в контроле, проявлялись признаки отечности собственной оболочки ИСК, реже встречались и были менее выражены локальные отеки и межклеточные расширения в сперматогенном эпителии. На этом фоне происходило усиление АОА на 22,2% (р Рисунок 1. Метаболические процессы в семенниках крыс при иммобилизационном стрессе и действии НИ ЭМИ. Здесь и на рис. 2 и 3: а — первичная профилактика; б — лечебно-профилактическое воздействие; светлые столбики — контроль; темные — опыт; * — р В печени характерным являлось значительное усиление АОА на 70,1% (р Рисунок 2. Метаболические процессы в печени крыс при иммобилизационном стрессе и действии НИ ЭМИ. Вместе с тем на фоне повышения АОА отмечалось снижение содержания общего белка на 22,1% (р Рисунок 3. Функциональная активность тимуса крыс при иммобилизационном стрессе и действии НИ ЭМИ. 1 — масса тимуса; 2 — число ядер тимоцитов (ТМ); 3 — связывание АО в ядре ТМ; 4 — удельная активность генома ТМ. Параллельно с выявленными адаптационными сдвигами во внутренних органах в сыворотке крови обнаруживались в виде тенденции изменения стрессорного характера — содержание кортизола превышало контрольный уровень (на 11,4%), а содержание тестостерона снижалось (на 22,3%).

Лечебно-профилактическое применение НИ ЭМИ после действия стресса также вызывало ослабление ряда постстрессорных нарушений и усиление адаптационно-компенсаторных реакций. В семенниках это проявлялось в улучшении процессов сперматогенеза к 9-м суткам после стресса: число ИСК с 4 генерациями клеток возрастало на 48,0% (р Рисунок 4. Ультраструктурные изменения собственной оболочки ИСК при иммобилизационном стрессе и действии НИ ЭМИ. а — интактная крыса. Собственная оболочка ИСК; б — иммобилизационный стресс. Контроль. Утолщение собственной оболочки ИСК, в основном за счет выраженного отека ее внутреннего неклеточного слоя, видны мелкие локальные скопления отечной жидкости (стрелки); в — иммобилизационный стресс. Влияние НИ ЭМИ после действия стресса. Улучшение ультраструктуры собственной оболочки ИСК-ослабление явлений отека, уменьшение общей ее толщины. На данном участке собственной оболочки сохраняются процессы повышенного везикулообразования (стрелка). ×18 000. СО — собственная оболочка. Местами выявлялась активация процессов регенерации в миоидных клетках собственной оболочки в виде увеличения белоксинтезирующих органелл. Все эти благоприятные сдвиги свидетельствовали о снижении проницаемости барьерных структур и об улучшении процессов микроциркуляции. На этом фоне АОА повышалась на 24,2% (р

Источник